苦参碱抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖和诱导凋亡的体外实验研究

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目的探讨苦参碱对人骨肉瘤细胞株M G-63的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法应用M TT比色法检测不同作用浓度以及不同作用时间苦参碱对M G-63细胞的增殖作用的影响;流式细胞仪分析不同浓度加药组及对照组第3天M G-63细胞周期的改变,并通过分析细胞DNA含量测定凋亡;应用透射电镜观察经不同浓度苦参碱处理3天后M G-63细胞的形态改变。结果苦参碱对M G-63细胞增殖具有抑制作用,其增殖抑制作用随作用时间延长及药物浓度升高更加明显,具有时间和剂量依赖性。流式细胞仪检测可见经苦参碱处理后G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例下降及低G1期细胞出现,并形成亚二倍体峰(凋亡峰)。对照组和0.25,0.50,0.75,1.0,1.25 m g/m l各处理组中,凋亡细胞比例分别为1.2%、6.7%、21.5%、32.9%、45.8%和51.9%,在实验范围内苦参碱诱导细胞凋亡作用与药物浓度呈一定相关。透视电镜可见典型的细胞凋亡形态改变:细胞皱缩,胞膜结构保持完整,胞核固缩,核碎裂,染色质浓缩边集,形成新月形胞核,胞浆空泡化明显,细胞表面有较多浓缩的胞质突起。结论苦参碱对人骨肉瘤细胞M G-63的增殖具有明显的抑制作用,使细胞阻滞于G0/G1期,并且能诱导其凋亡,其作用具有时间和剂量依赖性。
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