目的　调查产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素酶（AmpC酶）的发生率及其基因型。方法　收集北京朝阳医院2001年1～12月头孢西丁耐药的产ESBLs的24株大肠埃希菌、8株肺炎克雷伯菌，采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点；接合试验证实酶基因有无可转移性；脉冲场凝胶电泳（PFGE）确定耐药株的亲缘关系；对AmpC酶基因进行多重PCR及序列分析确定其基因型。结果　2001年北京朝阳医院ESBLs的发生率，大肠埃希菌为16.8％（49/292），肺炎克雷伯菌为16.5％（35/212）；ESBLs株中质粒AmpC酶的发生率，大肠埃希菌为2.0％（1/49），肺炎克雷伯菌为17.1％（6/35）。这7株菌均产生DHA-1型AmpC酶；1株肺炎克雷伯菌可将头孢西丁耐药性传给受菌体。该7株菌都产TEM-1酶、5株产CTX-M-3型ESBL、2株产SHV-12型ESBL；该7株菌携带质粒2～5个，且都有约33～36kb的大质粒。PFGE发现这7株菌来自多个不同的克隆株。结论　北京朝阳医院ESBL阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中，有7株既产DHA-1型质粒AmpC酶，又产CTX-M-3或SHV-12ESBL。这7株菌来自多个不同的克隆株。