人参皂苷Rb1逆转白消安干预人脐静脉内皮细胞NO生成作用及其信号转导机制

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目的:研究人参皂苷Rb1对白消安(BU)干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮(NO)合成作用的影响,并进一步探讨此影响的信号转导机制。方法:体外培养HUVEC,以硝酸还原酶法检测各组细胞培养上清液中NO的含量,实时荧光定量PCR(RealTime-PCR)法检测HUVEC中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达;以特异性抑制剂LY294002阻断PI3K/AKT信号转导通路,Western blot印迹法检测细胞内磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶AKT(P-AKT)表达。结果:①BU明显降低HUVEC中的eNOSmRNA表达及细胞培养上清中的NO水平;预先用人参皂苷Rb1干预可以拮抗BU对HUVEC的这种影响,提高eNOS mRNA表达及NO合成;②BU明显抑制HUVEC表达P-AKT,Rb1则可增强P-AKT表达,拮抗白消安对P-AKT的抑制作用;③人参皂苷Rb1拮抗白消安抑制内皮细胞NO合成的作用能被LY294002拮抗;40μmol.L-1的LY294002即可明显抑制磷酸化AKT的表达和NO的合成。结论:BU可抑制HUVEC合成NO,人参皂苷Rb1可逆转此作用,其机制与激活PI3K/AKT信号转导通路密切相关。人参皂苷可能籍此机制保护血管内皮细胞免受化疗药物损伤。
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