DNA甲基化PCR方法的优化

来源 :武警医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:winskinglee
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【目的】优化DNA甲基化PCR的反应体系及扩增参数,为基因甲基化的研究建立一个最佳的PCR方法。【方法】以MHCC-97H肝癌细胞株AFP基因启动子区为模板,分析DNA甲基化反应体系中Mg^2+、TaqDNA聚合酶用量、加入时间、退火温度及循环方式对甲基化PCR扩增的影响。【结果】反应体系20μl:模板DNA(MoDNA),2μl;正向引物,1μl;反向引物,1μl;10×PCR Buffer,2.5μl;2mmol/LdNTPs,2.5μl;Taq酶,0.4μl;MgCl2,2μl;H2O,8
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