【摘 要】
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目的:探讨刺芒柄花素通过调控SIRT1/PGC-1α通路对脓毒症诱导的急性肾损伤(SAKI)的影响及作用.方法:采用盲肠结扎穿刺法(CLP)制备脓毒症大鼠模型,造模成功后选择60只大鼠分为模型组、刺芒柄花素低剂量组、刺芒柄花素中剂量组、刺芒柄花素高剂量组和高剂量刺芒柄花素+SIRT1特异性阻断剂EX527组,另设假手术组,每组12只.腹腔注射刺芒柄花素或EX527进行干预,1次/d,连续3d.采用全自动生化分析仪检测血清中Cys C、BUN和Scr含量;HE染色观察肾组织病理学变化;DHE探针法检测肾组织
【机 构】
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湖南省儿童医院,湖南 长沙410007
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目的:探讨刺芒柄花素通过调控SIRT1/PGC-1α通路对脓毒症诱导的急性肾损伤(SAKI)的影响及作用.方法:采用盲肠结扎穿刺法(CLP)制备脓毒症大鼠模型,造模成功后选择60只大鼠分为模型组、刺芒柄花素低剂量组、刺芒柄花素中剂量组、刺芒柄花素高剂量组和高剂量刺芒柄花素+SIRT1特异性阻断剂EX527组,另设假手术组,每组12只.腹腔注射刺芒柄花素或EX527进行干预,1次/d,连续3d.采用全自动生化分析仪检测血清中Cys C、BUN和Scr含量;HE染色观察肾组织病理学变化;DHE探针法检测肾组织中活性氧(ROS)水平;EHSA检测肾组织中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;qRT-PCR检测肾组织线粒体DNA(mtDNA)拷贝数以及肾组织中SIRT1 mRNA、PGC-1α mRNA、NRF-1 mRNA及TFAM mRNA表达水平;Western blotting检测肾组织中SIRT1、PGC-1α、NRF-1及TFAM蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾组织损伤严重,血清Cys C、BUN、Scr含量明显升高(P＜0.01),肾组织线粒体mtDNA拷贝数明显降低(P＜0.01),ROS水平、MDA含量明显升高(P＜0.01),SOD活性明显降低(P＜0.01),同时肾组织中SIRT1、PGC-1α、NRF-1和TFAM mRNA及蛋白表达水平也明显降低(P＜0.01).与模型组比较,刺芒柄花素中、高剂量组大鼠肾损伤明显改善,血清Cys C、BUN、Scr舍量均明显降低(P＜0.05),肾组织线粒体mtDNA拷贝数明显增加(P＜0.05),ROS水平、MDA含量明显降低(P＜0.05),SOD活性明显增加(P＜0.05),同时肾组织中SIRT1、PGC-1α、NRF-1和TFAM mRNA及蛋白表达水平也明显升高(P＜0.05),刺芒柄花素低剂量组大鼠以上各指标与模型组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).然而,EX527干预可明显抑制高剂量刺芒柄花素对SAKI的改善作用.结论:刺芒柄花素可提高肾脏组织线粒体生物合成,减少线粒体氧化应激损伤,进而改善SAKI,其作用机制可能与激活SIRT1/PGC-1α信号通路有关.
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