【摘 要】
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目的:通过oligo化学合成及PCR扩增法合成人显性抑制TGF-βⅡ型受体目的基因,并建立其真核表达载体。方法:根据Genebank数据库确定显性抑制TβRⅡ目的基因,利用化学合成法进行单
【机 构】
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解放军总医院肿瘤内科,第二炮兵总医院干部病区
【基金项目】
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军队十一五攻关项目(项目编号:06G106)
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目的:通过oligo化学合成及PCR扩增法合成人显性抑制TGF-βⅡ型受体目的基因,并建立其真核表达载体。方法:根据Genebank数据库确定显性抑制TβRⅡ目的基因,利用化学合成法进行单链oligo的合成,PCR法将合成的oligo拼接成完整的序列,装入PMD18-T载体并转染感受态细胞DH5。经XhoI和Eco-RI酶切后连接至目的载体PIRES2-AcGFP中,转染COS-7细胞,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序鉴定,用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测DNT
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