【摘 要】
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【目的】建立一种能扩增dnaJ基因全长的PCR检测方法,为弧菌的快速筛查及种类鉴定提供技术支持.【方法】以弧菌dnaJ基因为靶基因,在其首尾的保守区域设计一对简并引物,经优化
【机 构】
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广西水产科学研究院/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室
【基金项目】
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广西创新驱动发展专项项目（桂科AA17204081-4）,广西自然科学基金项目（2015GXNSFBA139069）,广西水产畜牧兽医局科技推广应用项目（桂渔牧科201633022）,广西直属公益性科研院所基本科研业务费专项项目（GXIF-2016-10）
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【目的】建立一种能扩增dnaJ基因全长的PCR检测方法,为弧菌的快速筛查及种类鉴定提供技术支持.【方法】以弧菌dnaJ基因为靶基因,在其首尾的保守区域设计一对简并引物,经优化退火温度和引物浓度,建立能扩增弧菌接近全长dnaJ基因的PCR检测方法,并通过特异性试验、灵敏度试验和临床应用评价等验证其适用性.【结果】优化后的PCR反应体系50.0 μL： 2×F8 FastLongPCRMasterMix 25.0 μL, 上、下游引物 （20 μmol/L） 各2.0 μL, DNA模板5.0 μL
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