【摘 要】
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目的:构建布鲁氏菌2308株ery基因启动子缺失株.方法:用PCR方法从亲本株2308上扩增ery基因启动子侧翼序列,将该片段与pMD19 -T连接,亚克隆为自杀载体pGEM - 7zf - △ery - sac
【机 构】
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石河子大学动物科技学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室
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目的:构建布鲁氏菌2308株ery基因启动子缺失株.方法:用PCR方法从亲本株2308上扩增ery基因启动子侧翼序列,将该片段与pMD19 -T连接,亚克隆为自杀载体pGEM - 7zf - △ery - sacB.将自杀载体电转化布鲁氏菌感受态细胞中经同源重组后,分别用100 mg/L氨苄和7％蔗糖筛选.对获得的基因缺失株进行RT - PCR鉴定和遗传稳定性检测.结果:成功获得ery基因启动子缺失株,2308△ery基因启动子缺失株未扩增出eryA基因.并且该缺失株在10代以内未发生回复突变.结论:成功构建2308△ery基因启动子缺失株,为研究布鲁氏菌的毒力基因及其流产机制奠定基础.
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