【摘 要】
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目的:构建用于体内剪接分析的人糖皮质激素受体(hGR)小基因真核表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,设计特定的引物进行PCR扩增获得3.892kb长的hGR小基因片段,并将其连入pMD18-TSim
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院干部呼吸内科,中国科学技术大学生命科学院实验中心
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目的:构建用于体内剪接分析的人糖皮质激素受体(hGR)小基因真核表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,设计特定的引物进行PCR扩增获得3.892kb长的hGR小基因片段,并将其连入pMD18-TSimple载体中,限制性内切酶酶切鉴定后,再亚克隆到PcDNA,载体中,获得hGR小基因真核表达质粒PcDNA,-hGR并测序验证。Lipofectamine法转染PcDNA3-hGR至HeLa细胞,RT—PCR检测hGR小基因剪接异构体hGRα and hGRβ mRNA的表达。结果:限制性内切酶酶切和DNA
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