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【摘 要】 目的 建立妇康片中人参皂甙Rg1，Re，Rb1的含量测定方法 。方法 采用HPLC法，以乙腈-水梯度洗脱，检测波长为203nm。测定人参皂Rg1，Re，Rb1的含量。结果 通过方法学考察，人参皂甙Rg1，Re，Rb1分别在9.24-92.4μg/mL，0.384-3.84μg/mL， ，5.55～1.355μg/mL的范围內，分别与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率分别为100.71%，98.14%，100.94%，RSD分别为1.67%，0.44%，1.77%。结论 该方法操作简单，重复性好，可用于评价妇康片中人参的质量。
【关键词】 妇康片 人参皂甙Rg1 Re Rb1 HPLC
【中图分类号】 R91 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）09-0288-01
1 仪器与试药
WATERS-515高效液相色谱仪，WATERS 2998 Photodiode Array Detector检测器组成。对照品人参皂甙Rg1，Re，Rb1 （110723-201128，110754-201324，110704-201223，购自中国药品生物制品检定所）；妇康片（吉林吉春制药有限公司，批号为140501），乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件系统及系统适用性实验
色谱柱：DIKMA （Diamosil C18，5μm 250×4.6mm）；流动相：乙腈（A）-水（B）（A%为19%→19%→29%-→29-%→40%，相应时间周期0→35min→55min→70min→100min）；流速1.0mL？min-1.在上述色谱条件下，理论板数按人参皂甙Rg1记不得低于1000.
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液。精密称人参皂甙Rg1，Re，Rb1对照品置10ml容量瓶中制成每毫升含91mg，18mg，63mg的溶液。精密量取上述对照品溶液各1ml，置10ml容量瓶中，甲醇定容做为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液[1]。取本品内容物10片，研细，取约1.0g，精密成定，置索氏提取器中，三氯甲烷加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，挥干，连同滤纸放入100ml的锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50ml，密塞，放置过夜，超生处理30分钟，滤过，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液即得。
2.3 方法学验证
2.3.1 专属性考察。对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测定，样品中主峰保留时间和对照品主峰保留时间一直，无干扰。
2.3.2 线性关系考察[2]。精密量取人参皂甙Rg1，Re，Rb1混合对照品溶液1、2、4、5ml分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀。精密吸取混合对照品溶液20μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以对照品进样质量浓度（μg /ml-1）为横坐标，峰面积为纵坐标，人参皂甙Rg1，Re，Rb1的标准曲线分别为y=9785.4x-735.2，y=643.01x+9.9133，y=12524x-2497.7，相关系数分别为0.9999，0.9993，0.9995，相关系数良好。
2.3.3 精密度实验。精密吸取对照品溶液按上述色谱条件连续进样6次，测定色谱峰面积，以峰面积RSD分别为0.45%，1.34%，0.93%。表明仪器精密度良好。
2.3.4 稳定性实验。取本品，精密称取0.5g，按“2.2.2”项下制备供试品，精密量取10μl，按0，2，4，6，8，10，24小时间隔进样，测定色谱峰面积RSD分别为0.21%，0.57%，1.41%，表明供试品溶液待测成分在室温放置24小时内基本稳定。
2.3.5 重复性实验。取本品，按供试品溶液制备方法制成5份供试
品溶液，依上述色谱条件进样测定。含量的平均值RSD分别为0.57%，1.62%，1.75%，重复性良好。
2.3.6 回收率实验。取已知含量的本品溶液0.5ml，精密加入对照品溶液0.5ml（每1ml分别含人参皂甙Rg1，Re，Rb1对照品分别为98.22μg，3.05μg，50.17μg，依上述条件进行测定，计算回收率，结果见表1
表1 加样回收率结果
2.4 样品测定
经采用“2.2.2”项下方法，测定3份样品中人参皂甙Rg1，Re，Rb1的含量，测定结果见表2
表2 样品人参皂甙Rg1，Re，Rb1含量测定结果（μg /g-1）
3 讨论
本实验考察了正丁醇超声之前采用三氯甲烷回流除杂，结果发现除杂后得到的总皂苷含量为18.26mg/g，低于直接用正丁醇超声得18.33mg/g，但最终考虑到脂溶性成分对人参皂苷分离的影响，最终选择了三氯甲烷回流法。
本方法准确快速，可有效控制妇康片中人参中质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2010年版一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：8.
[2]杨先启，卓开华，陈军，等.HPLC法测定RRLC法分析人参中人参皂苷Rg1，Re，Rb1[J].药物分析杂志，2008，28（7）：1144-1146.
【关键词】 妇康片 人参皂甙Rg1 Re Rb1 HPLC
【中图分类号】 R91 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）09-0288-01
1 仪器与试药
WATERS-515高效液相色谱仪，WATERS 2998 Photodiode Array Detector检测器组成。对照品人参皂甙Rg1，Re，Rb1 （110723-201128，110754-201324，110704-201223，购自中国药品生物制品检定所）；妇康片（吉林吉春制药有限公司，批号为140501），乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件系统及系统适用性实验
色谱柱：DIKMA （Diamosil C18，5μm 250×4.6mm）；流动相：乙腈（A）-水（B）（A%为19%→19%→29%-→29-%→40%，相应时间周期0→35min→55min→70min→100min）；流速1.0mL？min-1.在上述色谱条件下，理论板数按人参皂甙Rg1记不得低于1000.
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液。精密称人参皂甙Rg1，Re，Rb1对照品置10ml容量瓶中制成每毫升含91mg，18mg，63mg的溶液。精密量取上述对照品溶液各1ml，置10ml容量瓶中，甲醇定容做为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液[1]。取本品内容物10片，研细，取约1.0g，精密成定，置索氏提取器中，三氯甲烷加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，挥干，连同滤纸放入100ml的锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50ml，密塞，放置过夜，超生处理30分钟，滤过，精密量取续滤液25ml，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液即得。
2.3 方法学验证
2.3.1 专属性考察。对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下测定，样品中主峰保留时间和对照品主峰保留时间一直，无干扰。
2.3.2 线性关系考察[2]。精密量取人参皂甙Rg1，Re，Rb1混合对照品溶液1、2、4、5ml分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀。精密吸取混合对照品溶液20μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以对照品进样质量浓度（μg /ml-1）为横坐标，峰面积为纵坐标，人参皂甙Rg1，Re，Rb1的标准曲线分别为y=9785.4x-735.2，y=643.01x+9.9133，y=12524x-2497.7，相关系数分别为0.9999，0.9993，0.9995，相关系数良好。
2.3.3 精密度实验。精密吸取对照品溶液按上述色谱条件连续进样6次，测定色谱峰面积，以峰面积RSD分别为0.45%，1.34%，0.93%。表明仪器精密度良好。
2.3.4 稳定性实验。取本品，精密称取0.5g，按“2.2.2”项下制备供试品，精密量取10μl，按0，2，4，6，8，10，24小时间隔进样，测定色谱峰面积RSD分别为0.21%，0.57%，1.41%，表明供试品溶液待测成分在室温放置24小时内基本稳定。
2.3.5 重复性实验。取本品，按供试品溶液制备方法制成5份供试
品溶液，依上述色谱条件进样测定。含量的平均值RSD分别为0.57%，1.62%，1.75%，重复性良好。
2.3.6 回收率实验。取已知含量的本品溶液0.5ml，精密加入对照品溶液0.5ml（每1ml分别含人参皂甙Rg1，Re，Rb1对照品分别为98.22μg，3.05μg，50.17μg，依上述条件进行测定，计算回收率，结果见表1
表1 加样回收率结果
2.4 样品测定
经采用“2.2.2”项下方法，测定3份样品中人参皂甙Rg1，Re，Rb1的含量，测定结果见表2
表2 样品人参皂甙Rg1，Re，Rb1含量测定结果（μg /g-1）
3 讨论
本实验考察了正丁醇超声之前采用三氯甲烷回流除杂，结果发现除杂后得到的总皂苷含量为18.26mg/g，低于直接用正丁醇超声得18.33mg/g，但最终考虑到脂溶性成分对人参皂苷分离的影响，最终选择了三氯甲烷回流法。
本方法准确快速，可有效控制妇康片中人参中质量。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2010年版一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：8.
[2]杨先启，卓开华，陈军，等.HPLC法测定RRLC法分析人参中人参皂苷Rg1，Re，Rb1[J].药物分析杂志，2008，28（7）：1144-1146.