【摘 要】
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目的 将人细胞色素P4501A2(CYP1A2)基因转染骨髓间充质干细胞(BMSC),检测转基因BMSC协同化疗前药达卡巴嗪(DTIC)对人恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞的靶向促凋亡作用,为以间充质干细胞为载体的“基因介导的酶-前药双靶向抗肿瘤策略”提供体外实验依据。方法从人肝细胞中克隆CYP1A2基因,构建真核表达载体,分离、鉴定并培养BMSC,脂质体法将CYP1A2基因导入BMSC和Raji细胞
【机 构】
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贵阳医学院附属医院血液科,550004,贵阳医学院附属医院血液科,550004,贵阳医学院附属医院血液科,550004,贵州省人民医院中心实验室,贵阳医学院分子生物学重点实验室,贵阳医学院附属医院药剂
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目的 将人细胞色素P4501A2(CYP1A2)基因转染骨髓间充质干细胞(BMSC),检测转基因BMSC协同化疗前药达卡巴嗪(DTIC)对人恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞的靶向促凋亡作用,为以间充质干细胞为载体的“基因介导的酶-前药双靶向抗肿瘤策略”提供体外实验依据。方法从人肝细胞中克隆CYP1A2基因,构建真核表达载体,分离、鉴定并培养BMSC,脂质体法将CYP1A2基因导入BMSC和Raji细胞中,RT—PCR和Western blot法检测CYP1A2基因的表达,Trans well法检测BMSC的肿瘤靶向性,MTF法检测转基因Raji细胞对DTIC敏感性的改变,Annexin V/PI染色标记法检测转基因BMSC联合DTIC诱导Raji细胞凋亡的作用。结果成功克隆CYP1A2基因并将构建的真核表达载体转染BMSC和Raji细胞,流式细胞术检测体外诱导分化结果符合BMSC特性,RT-PCR和Westernblot检测到转基因细胞中CYP1A2表达,Transwell迁移实验证实BMSC有肿瘤趋向性,MTT法检测显示DTIC呈剂量依赖性抑制转CYPIA2基因的Raji细胞生长,而转CYP1A2基因的BMSC细胞对DTIC相对耐受(IC50值分别为1.67mmol/L和7.53mmol/L,P〈0.01)。AnnexinV/PI染色法显示CYP1A2能够使细胞在体外代谢DTIC,产生细胞毒效应使肿瘤细胞凋亡,而且具有旁观者效应。结论CYP1A2可使细胞在体外代谢DTIC产生细胞毒效应。以BMSC为载体的CYP1A2-DTIC酶-前药系统可发挥双靶向抗肿瘤作用,在体外诱导人恶性淋巴瘤细胞凋亡。
其他文献
DOI:10.16661/j.cnki.1672-3791.2108-5042-6202 摘 要:随着社会的快速发展,互联网的使用率越来越高。目前,人们对物质生活的需求逐渐提高,通过互联网,网红经济发展十分迅速。我国网红经济处于发展旺盛的阶段并拥有较强大的规模。网红经济的主要发起者由不同种类群体组成,通过直播、短视频录制等方式进行产品推广与销售进而影响了人们的消费与生活。通过短视频平台,例如抖音
多中心型Castleman病(muhicentric Castleman disease,MCD)首先由Gaba等[1]于1978年报道,临床表现多样化,常有多系统受累,部分可合并POEMS综合征或进展为Kaposi肉瘤或恶性淋巴瘤[2],但尚无合并多发性骨髓瘤(MM)的报道。
患者,男,33岁.患骨髓增生异常综合征(MDS)同时伴HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)、HBV-DNA(+),血型O型。
不典型慢性粒细胞白血病(aCML)是Ph染色体及bcrabl融合基因均阴性的克隆性造血异常疾病[1].该病不是传统CML的变异,而是初诊时骨髓增生异常和骨髓增殖性疾病同时表现的白血病。
目的 探讨日前中国慢性粒细胞白血病(CML)患者的特征和诊断及治疗模式.方法 收集并分析分布于中国不同地区的15家医院血液科2005年住院CML患者病例资料和2006年7月至9月在这15家医院门诊的CML患者门诊资料.结果 共收集1824例患者资料,其中住院患者722例,门诊患者1102例;男女比例1.78:1,确诊时中位年龄40.02(2.45~83.29)岁.90.41%的患者为慢性期,但在凋
目的 探讨有机阳离子转运体1(hOCT1)基因多态性与伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病(CML)疗效的相关性,为临床个体化治疗提供参考依据.方法 利用突变特异性扩增系统(ARMS)-PCR,检测76例血液病患者(74例汉族、2例藏族)hOCT1基因P283L、R287G、M408V多态性位点分布频率,其中53例为伊马替尼治疗的CML患者,结合临床疗效判断多态性与伊马替尼疗效的相关性.结果 ①74例汉族
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者常有反复的血红蛋白尿和持久的贫血,究竟是什么原因导致PNH克隆优势造血呢?研究表明,WT1基因启动子区DNA甲基化状态是使PNH克隆大量扩增的机制之一~([1-2]).我们采用甲基化特异性PCR(MSP)法研究PNH患者、再生障碍性贫血(AA)患者WTI基因启动子区域DNA甲基化模式的改变,初步探讨表观遗传学调控方式在PNH和AA发病机制中的作用。
DOI:10.16661/j.cnki.1672-3791.2109-5042-3787 摘 要:当下,积极心理学依然是心理学研究的主流,该文从中国知网、万方两个数据库遴选了2003—2020年期间刊载在核心期刊的文献490篇,通过使用NoteExpress软件,对文献进行计量分析,从文章发表年代、关键词、来源刊、作者等方面进行了相关的分析、归纳、整理,对积极心理学在国内的研究现状和特点进行了阐
造血干细胞移植(HSCT)是治疗难治性血液系统及一些非血液系统疾病的有效手段.移植并发症是影响移植成功和预后的重要因素.血管内皮损伤是引起HSCT并发症的重要冈素,并且影响造血干细胞的归巢.我们采用环磷酰胺(cy)和白消安(Bu)为预处理方案,观察在清髓时药物对小鼠组织器官血管内皮的影响,从而探索发生HSCT并发症的又一可能机制。
目的 探讨含氟达拉滨的预处理方案对单倍型造血干细胞移植(HSCT)治疗的可行性和安全性.方法 对35例恶性血液病患者进行单倍型HSCT,其中标危4例,高危16例,复发未缓解15例,所有患者改良预处理用氟达拉滨取代静脉环磷酰胺,氟达拉滨用量为40 mg·m-2·d-1,连用5 d,供者接受rhG-CSF后采集造血干细胞,1例外周血HSCT,1例骨髓移植,33例骨髓加外周血造血干细胞联合移植,移植后观