【摘 要】
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【目的】了解扩增效率评价对现行定量PCR的外标定量法结果的影响。【方法】将两份HBV阳性血清样本梯度稀释4个梯度后PCR,建立血清样本的标准曲线。同时比较两份血清样本标准
【机 构】
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湖南省怀化市第三人民医院暨怀化医专附属医院检验科
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【目的】了解扩增效率评价对现行定量PCR的外标定量法结果的影响。【方法】将两份HBV阳性血清样本梯度稀释4个梯度后PCR,建立血清样本的标准曲线。同时比较两份血清样本标准曲线以及与试剂盒标准品的标准曲线的差异,并利用E=10-1/Slope公式计算不同样本及标准品的扩增效率。比较扩增效率评价前后外标法定量结果之间的差异。【结果】发现同一样本的扩增效率不同批次PCR扩增效率变化很小,然而不同样本之间扩增效率存在明显的差异。对扩增效率评价前后同一样本的定量分析的结果差异巨大,达到了93%。【结论】采用荧光PCR外标定量法对未知样本进行定量分析时应对其扩增效率进行评价。
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