【摘 要】
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为构建一株高效表达内切β-1,3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株,并用于水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1,3-葡聚糖酶基因进行随机突变,并构建BGN13.1a
【机 构】
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江南大学生物工程学院,江苏艾津农化有限责任公司,无锡格莱克斯生物科技有限公司,江南大学环境与土木工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31301408),江南大学自主科研计划重点项目(JUSRP51632A),江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2018367)。
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为构建一株高效表达内切β-1,3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株,并用于水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1,3-葡聚糖酶基因进行随机突变,并构建BGN13.1a突变库;然后采用高通量技术及刚果红平板筛选高表达菌株;最后采用TLC薄层色谱和MALDI-TOF MS分析热凝胶水解产物,并分析了酶学性质。结果表明,本研究成功筛选得到毕赤酵母突变株K827,酶活较初始菌株提高了25%;其水解产物聚合度为2~10,且寡糖产量为1.492 g/L;其最适pH与最适温度分别为5.5和50℃;相较
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