Notch3过表达对心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的抑制作用

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目的:探讨Notch3过表达对心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化的作用。方法:用胶原酶消化法分离培养SD仔鼠的CFs,将CFs于10ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)中孵育24h,用羟脯氨酸试剂盒检测细胞上清羟脯氨酸含量,免疫荧光法检测CFs中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,用Western-blotting检测Notch3蛋白表达;利用慢病毒转染CFs,使其过表达Notch3,确定最佳转染条件为感染复数(MOI)20,转染时间72h,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)表达
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