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目的：基于 Cre-LoxP 系统构建携带 EGFP 及 Puromycin 抗性基因，并带有巨细胞病毒（CMV）及翻译延伸因子1α（EF1α）双启动子的新型慢病毒表达载体，为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统．方法：以已经插入 LoxP 序列的 pLOX-TERT-iresTK 慢病毒载体为模板，用 SpeI 与 KpnI 进行双酶切，去除 TERT-iresTK片段，然后与人工设计合成的多克隆位点片段连接，构建 pLOX-MCS 表达载体．同时，以 pB513载体为模板扩增EF1α-EGF