重组人乳铁蛋白基因克隆及表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dong33261

【摘要】

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目的构建重组人乳铁蛋白(HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株,并对表达产物进行评价.方法由外周血白细胞总RNA经RT-PCR克隆获得HLF基因结构cDNA,测序后克隆人酵母表达载体获得质粒pP

【作者】

：

张述王革非王贞慧张裕平吴海祥熊春发余永恒

【机构】

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丝宝集团科研中心生命科学研究所

【出处】

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中国生物制品学杂志

【发表日期】

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2005年2期

【关键词】

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分泌表达外周血白细胞人乳铁蛋白菌株克隆抗体反应 RT-PCR 毕赤酵母诱导表达电转化 Human lactoferin Cloning Expre

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目的构建重组人乳铁蛋白(HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株,并对表达产物进行评价.方法由外周血白细胞总RNA经RT-PCR克隆获得HLF基因结构cDNA,测序后克隆人酵母表达载体获得质粒pPIC9K-HLF,线性化后电转化入毕赤酵母,经G418-YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达.结果获得基因与GenBank中的人HLF01基因基本相符.2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体反应,具有抑制大肠杆菌生长的作用.结论获得了能分泌有活性HLF的重组人乳铁蛋白(HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株.

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