【摘 要】
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目的利用含重组质粒pBAD/HBs Fab的Top10大肠杆菌 ,优化表达人源抗-HBs Fab.方法选取含pBAD/HBs Fab载体的Top10大肠杆菌单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于摇瓶和 K
【机 构】
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中山大学中山医学院法医病理学教研室,第二军医大学长征医
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目的利用含重组质粒pBAD/HBs Fab的Top10大肠杆菌 ,优化表达人源抗-HBs Fab.方法选取含pBAD/HBs Fab载体的Top10大肠杆菌单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于摇瓶和 KLF2000发酵罐中,摇瓶培养表达采用不同的菌体诱导起始密度、诱导剂浓度、诱导表达温度和诱导表达时间.发酵罐培养表达采用不同的培养基和菌体诱导起始密度.诱导表达完毕后,纯化蛋白,比较表达量,并鉴定所获蛋白的抗原性和生物学活性.结果用摇瓶优化表达后,Fab蛋白占菌体总蛋白的6%,为0.8 mg/g菌体,
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