【摘 要】
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目的观察用DispaseⅡ与胰酶-EDTA冷热交替消化获取的兔角膜缘干细胞体外培养的优化方法。方法获取兔角膜缘组织,分为优化组和常规组。优化组用DispaseⅡ中4℃与胰酶-EDTA中37
【机 构】
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山西医科大学,山西医科大学第二医院眼科,山西省长治市妇幼保健院儿保科眼保健中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(30973248);山西省回国留学人员科研资助基金(200860);山西省留学人员科技择优项目基金(200856)
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目的观察用DispaseⅡ与胰酶-EDTA冷热交替消化获取的兔角膜缘干细胞体外培养的优化方法。方法获取兔角膜缘组织,分为优化组和常规组。优化组用DispaseⅡ中4℃与胰酶-EDTA中37℃冷热交替消化,常规组用DispaseⅡ中37℃制成单细胞悬液,两组均用含10%血清的培养基进行培养。观察细胞的形态及生长情况,结晶紫染色检测其增殖能力,免疫细胞化学染色方法对细胞进行鉴定。结果与常规组相比,优化组兔角膜缘干细胞表现出相似的生长特性,有较高的增殖能力,细胞免疫化学染色优化组较常规组ΔNp63阳性细胞明显多,而角蛋白K3(AE5)阳性细胞较少。结论用DispaseⅡ与胰酶-EDTA冷热交替消化法获取的角膜缘干细胞可以在体外成功培养,为临床研究奠定更好的实验基础。
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