双价抗虫植物表达载体p3300-bt-ptα的构建及转基因烟草的初步检测

来源 :上海交通大学学报：农业科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aminhao

【摘要】

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用限制性内切酶HindⅢ酶切分别含有CryIA(α)和CryIA(c)基因的pGEM—4zf质粒得到Ubiquitin(玉米泛素)基因启动子驱动的CryIA(α)和CryIA(c)基因表达盒，将它们分别插入到用Hind

【作者】

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范媛媛庞永珍吴为胜姚剑虹唐克轩武天龙

【机构】

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上海交通大学农业与生物学院,复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室

【出处】

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上海交通大学学报：农业科学版

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

：

转基因植株表达载体限制性内切酶质粒 DNA聚合酶 PCR 双价抗虫基因转基因技术 binary insect resistance genes pta

【基金项目】

：

国家863计划资助项目(2001AA212141)

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用限制性内切酶HindⅢ酶切分别含有CryIA(α)和CryIA(c)基因的pGEM—4zf质粒得到Ubiquitin(玉米泛素)基因启动子驱动的CryIA(α)和CryIA(c)基因表达盒，将它们分别插入到用HindⅢ开环的pCAMBIA3300(含编码抗除草刑草丁辟的bar基因)载体上形成中间载体p3300—bt。采用Pfu高保真DNA聚合酶用PCR的方法从质粒pBI121-ptα上扩增得到含CaMV35S启动子和NOS终止子的ptα基因表达盒，然后插入到用Smα Ⅰ切开的中间载体p3300—bt中。

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