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目的：研究2次转基因对人胚胎干细胞（hESCs）多能分化特点和保持自我更新能力的影响。方法：构建携带非转录因子外源基因细胞毒性T细胞相关分子4免疫球蛋白（CTLA41g）、吲哚胺2，3双氧化酶（IDO）和荧光素酶的慢病毒载体，在hESCs先转导外源基因CTLA4Ig或IDO，完成筛选后转导外源基因荧光素酶。检测hESCs中外源基因的表达和功能，免疫组化和RT—PCR以及流式细胞仪方法检测hESCs细胞表面标记物、类胚体（EB）形成和体内畸胎瘤形成能力。结果：转导的外源基因均能表达并表现相应的功能。2次转导