论文部分内容阅读
目的
探索胰岛素样生长因子-2(IGF2)/胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)/胰岛素受体底物-1(IRS1)信号通路在ErbB2阳性乳腺癌细胞对Herceptin耐药中的作用。
方法qRT-PCR和western blot技术检测各细胞中的IGF2、IGF1R和IRS1的表达及其活化情况。荧光素酶报告基因验证miR-126对IRS1的靶向调控作用。在SKBR3/pool2细胞中分别抑制IGF1R活性、干预IRS1或miR-126表达，四唑氮化合物(MTS)检测该类细胞对Herceptin的敏感性。
结果相比于ErbB2阳性的亲本乳腺癌细胞SKBR3，在Herceptin耐受SKBR3/pool2中IGF2/IGF1R/IRS1信号通路活化，表现为IGF2、IGF1R和IRS1表达上调，且伴有IGF1R和IRS1活化；在SKBR3/pool2中使用IGF1R抑制剂PPP(picropodophyllin)可抑制该细胞IGF1R/IRS1信号活化，且增加该细胞对Herceptin的敏感性。用shRNA干扰IRS1可增加SKBR3/pool2细胞对Herceptin的敏感性。生物信息学预测结合报告基因实验证实miR-126可靶向调控IRS1。在SKBR3/pool2细胞中过表达miR-126可明显增加该细胞对Herceptin的敏感性。
结论IGF2/IGF1R/IRS1信号通路参与介导ErbB2阳性乳腺癌细胞对ErbB2靶向药物Herceptin的耐受。