【摘 要】
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目的:探讨沉默G蛋白偶联受体激酶3(G protein-coupled receptor kinase 3,GRK3)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院 检验科,上海 200011
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目的:探讨沉默G蛋白偶联受体激酶3(G protein-coupled receptor kinase 3,GRK3)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制.方法:利用Oncomine数据库分析GRK3在正常口腔组织及OSCC组织中的表达水平.用RNA干扰技术敲降GRK3在OSCC细胞WSU-HN6和CAL27中的表达,用qPCR法验证干扰效率后,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测敲降GRK3对OSCC细胞增殖和凋亡的影响,Transwell小室法检测对OSCC细胞迁移、侵袭能力的影响,qPCR法检测对OSCC细胞周期、上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase,MMP)相关分子mRNA水平表达的影响,WB法检测EMT及MMP相关分子的蛋白表达水平变化.结果:OSCC组织中GRK3的表达水平显著高于正常口腔组织(P<0.01).转染si-GRK3后,OSCC细胞中GRK3 mRNA表达水平均下调70％以上.敲降GRK3可显著抑制OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P0.05).敲降GRK3表达后,OSCC细胞的G0/G1期比例显著增高(P<0.01),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Cyclin D3、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinases 2,CDK2)和CDK4基因的mRNA表达降低(均P<0.05);EMT相关分子波形蛋白(Vimentin)、Zeb1和Slug表达降低,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达升高(均P<0.05);MMP3和MMP9表达降低(均P0.05).结论:GRK3可通过调节细胞周期促进OSCC细胞的增殖能力,并通过调控EMT和MMP增强细胞的迁移和侵袭能力.
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