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把编码猴轮状病毒（Rhesus rotavirus，RRV） Vp4抗原的第4基因片段插入到痘苗病毒表达载体pJSA1175的P7.5启动子下游，构建成在痘苗病毒P7.5启动子调控下表达猴轮状病毒Vp4抗原基因的重组质粒pJSA1175-Vp4。应用磷酸钙沉淀技术将pJSA1175-Vp4 DNA转入TK-143细胞，在BUDR和X-gal存在下筛选蓝色蚀斑。经3代以上纯化和病毒增殖，获重组病毒R-VJSA1175-Vp4。蚀斑滴定其滴度达到1.5×l011PFU/L。经核酸杂交试验证明所获得的重组痘苗病毒带有猴轮状病毒Vp4抗原基因。用重组病毒感染TK-143细胞（或Vero细胞），在感染后48h，用酶免疫法（EIA）检测受染细胞上清液和细胞裂解液中表达的猴轮状病毒Vp4抗原基因均呈阳性反应。本试验为本研究室轮状病毒基因工程疫苗的一部分，为深入了解轮状病毒基因结构及其功能在方法学上奠定了必要的基础。