【摘 要】
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【目的】研究不同生育期水稻根系内生固氮菌的多样性，分离鉴定内生固氮菌并筛选具有促生作用的菌株，为水稻生产中固氮菌的应用提供理论依据。【方法】采用无氮培养基培养方法，从拔节期和抽穗期佳辐占根系中分离内生固氮菌，通过扩增16S rRNA方法进行分子鉴定和系统进化分析；采用透明圈法进行溶磷解钾能力验证；采用乙炔还原法测定固氮酶活性。将分离的内生固氮菌株单独接种盆栽水稻幼苗，测定其对株高、根长、鲜质量的影
【基金项目】
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福建省自然科学基金项目（2020J011353）； 福建省农业科学院自由探索科技创新项目（ZYTS2019001）;福建省农业科学院科技创新团队项目（CXTD2021002-2）；
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【目的】研究不同生育期水稻根系内生固氮菌的多样性，分离鉴定内生固氮菌并筛选具有促生作用的菌株，为水稻生产中固氮菌的应用提供理论依据。【方法】采用无氮培养基培养方法，从拔节期和抽穗期佳辐占根系中分离内生固氮菌，通过扩增16S rRNA方法进行分子鉴定和系统进化分析；采用透明圈法进行溶磷解钾能力验证；采用乙炔还原法测定固氮酶活性。将分离的内生固氮菌株单独接种盆栽水稻幼苗，测定其对株高、根长、鲜质量的影响；将内生固氮菌混合菌液接种水稻品种佳辐占和台粳8号，于齐穂期测定倒1、倒2和倒3叶片的叶绿素含量（SPAD值）。【结果】从拔节期和抽穗期水稻根系中分别分离出10和20株内生固氮菌，且两个时期水稻根系内生固氮菌群多样性存在差异，拔节期以克雷伯氏菌属为主，而抽穗期以假单胞菌属为主。筛选出7株具有溶解无机磷能力的菌株，分别是J3、J10、J23、H27、H30、H33和H37。乙炔还原法测定结果表明，分离的内生固氮菌均具有弱固氮活性，其中H33和H40-2菌株固氮能力相对较强。将固氮菌回接水稻幼苗，H40-2和J3菌株对水稻株高、地上鲜质量、根长均有显著影响，可促进水稻生长。将固氮菌混合回接水稻根系，发现佳辐占叶片叶绿素含量与对照差异不显著，而台粳8号显著提高。【结论】分离的内生固氮菌株H40-2和J3在水稻苗期具有明显促生作用，可作为功能性内生固氮菌开发利用。
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