【摘 要】
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应用溶菌酶溶菌、硫酸铵沉淀蛋白质及新生霉素琼脂糖CL-68亲合层析相结合的方法,成功地从肺炎克雷伯氏菌900129分离到DNA旋转酶的A、B亚单位。单独的A、B亚单位均无DNA旋转酶活性,以A、B亚单位重建的酶
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应用溶菌酶溶菌、硫酸铵沉淀蛋白质及新生霉素琼脂糖CL-68亲合层析相结合的方法,成功地从肺炎克雷伯氏菌900129分离到DNA旋转酶的A、B亚单位。单独的A、B亚单位均无DNA旋转酶活性,以A、B亚单位重建的酶能将松弛的质粒(pBR322)DNA转变为超旋型。各种喹诺酮类药物对其活性具有抑制作用。萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、斯巴沙星、环丙沙星对该酶活性50%抑制浓度(1C_(50))分别为10.46、1.35、0.35、0.42和0.12μg/ml。各药物1C_(50)与其最低抑菌浓度(M1C)相平行。
The A and B subunits of DNA gyrase were successfully isolated from Klebsiella pneumoniae 900129 by lysozyme lysis, ammonium sulfate precipitation protein and neomycin-agarose CL-68 affinity chromatography. The A, B subunits alone did not have DNA gyrase activity and the enzymes that were reconstructed in the A and B subunits converted the relaxed plasmid (pBR322) DNA into a super spinon type. Various quinolones inhibit their activity. Nalidixic acid, norfloxacin, ofloxacin, sparfloxacin, ciprofloxacin 50% inhibitory concentration of this enzyme activity (1C_ (50)) were 10.46,1.35,0.35 , 0.42 and 0.12 μg / ml. Each drug 1C_ (50) and its minimum inhibitory concentration (M1C) parallel.
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