【摘 要】
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目的 研究microRNA-141(miR-141)对卵巢颗粒细胞增殖的影响,并探讨其在多囊卵巢综合征(PCOS)发生发展中的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR检测20例PCOS患者的卵巢组织、20
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院（武汉市妇幼保健院）妇产科
【基金项目】
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武汉市卫健委科研项目(WX15B10)。
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目的 研究microRNA-141(miR-141)对卵巢颗粒细胞增殖的影响,并探讨其在多囊卵巢综合征(PCOS)发生发展中的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR检测20例PCOS患者的卵巢组织、20例对照组的正常卵巢组织、人卵巢颗粒细胞KGN及人正常卵巢上皮细胞IOSE80中miR-141 mRNA表达水平;KGN细胞分为miR-141 minics组、LY294002+miR-141 minics组、雷帕霉素(rapamycin)+miR-141 minics组、NC组、对照组.采用MTT法和平板克隆实验检测各组细胞增殖和克隆形成能力,采用Western blot法检测各组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达水平.结果 PCOS卵巢组织miR-141 mRNA表达水平显著高于正常卵巢组织,人卵巢颗粒细胞KGN miR-141 mRNA表达水平高于人正常卵巢上皮细胞IOSE80(P<0.05);miR-141 minics组、LY294002+miR-141 minics组及rapamycin+miR-141 minics组miR-141 mRNA表达水平均高于NC组和对照组(P<0.05);LY294002+miR-141 minics组及rapamycin+miR-141 minics组转染后24、48、72、96 h OD值和克隆形成率均低于miR-141 minics组,但高于NC组和对照组(P<0.05);LY294002+miR-141 minics组转染后p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平低于miR-141 minics组,但高于NC组、对照组(P<0.05).rapamycin+miR-141 minics组转染后p-mTOR蛋白表达水平低于miR-141 minics组,高于NC组、对照组(P<0.05).结论 miR-141可通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路促进卵巢颗粒细胞的增殖.
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