中华蜜蜂MRJP7基因的原核表达及多克隆抗体的制备

来源 :上海交通大学学报:农业科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonycheungqd
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用PCR方法从含中华蜜蜂Accmrjp7基因的质粒DNA模板中扩增出MRJP7成熟肽编码区片段,将该片段克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行融合表达,SDS—PAGE和薄层扫描显示,该基因得到高效表达,表达产物大小约为66kDa,占细胞总蛋白的22.8%。利用割胶回收的方法,获得目的蛋白,注射兔子制备多克隆抗体,并利用所获抗体进行Western blot印迹分析,检测MRJPs,获得特异性条带。
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