定量检测人黄体生成素的超顺磁性免疫层析法的初步建立

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目的

应用超顺磁性磁珠标记的免疫层析技术建立用于黄体生成素(LH)快速定量检测的方法。

方法

采用NHS/EDC修饰磁珠,以1株LH单克隆抗体与磁珠偶联,另1株LH抗体包被于硝酸纤维素膜,建立双抗体夹心法与免疫层析相结合的定量检测方法,通过线性范围、精密度、准确度、特异性、稳定性等对所建方法进行性能评价。收集常规检测LH可信度较高的化学发光法(CLIA)检测后标本,再用所建方法重复检测,验证方法的可靠性。

结果

磁珠偶联LH抗体与LH结合后,与硝酸纤维素膜包被LH抗体反应磁信号检测最佳时间为20 min;所建方法低值、中值、高值变异系数(CV)为8%~12%;偏倚<10%;回收率为90%~120%,灵敏度为0.63 mIU/ml,与人绒毛膜促性腺激素(hCG)、促甲状腺激素(TSH)、促卵泡激素(FSH)无明显交叉反应,与CLIA比对检测结果,相关性良好(R2=0.96,P<0.05)。

结论

超顺磁性磁珠标记免疫层析法检测血清LH简便快速、灵敏度高,有望成为即时检验(POCT)方法定量检测生物样品中微量成分发展的方向。

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