【摘 要】
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目的 探究沉默信息调节因子2相关酶类3(SIRT3)-叉头盒转录因子O1(FOXO1)通路介导自噬在心肌细胞缺血再灌注损伤中的作用.方法 慢病毒感染H9C2心肌细胞构建SIRT3过表达稳定株.实验分4组:正常对照(NC)组、缺血再灌注(IR)组、SIRT3过表达+缺血再灌注(S+IR)组、SIRT3过表达+IR+SIRT3抑制剂(S+IR+3-TYP)组.Western blot检测SIRT3、乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)、自噬标记蛋白LC3B、Beclin1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院心血管内科 230032
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目的 探究沉默信息调节因子2相关酶类3(SIRT3)-叉头盒转录因子O1(FOXO1)通路介导自噬在心肌细胞缺血再灌注损伤中的作用.方法 慢病毒感染H9C2心肌细胞构建SIRT3过表达稳定株.实验分4组:正常对照(NC)组、缺血再灌注(IR)组、SIRT3过表达+缺血再灌注(S+IR)组、SIRT3过表达+IR+SIRT3抑制剂(S+IR+3-TYP)组.Western blot检测SIRT3、乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)、自噬标记蛋白LC3B、Beclin1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达;流式细胞分析仪检测细胞凋亡率;全自动生化仪检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平.结果 与NC组相比,IR组SIRT3表达降低,Ac-FOXO1表达升高,自噬标记蛋白LC3B、Beclin1表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达升高,LDH水平和细胞凋亡率升高(P<0.05).与IR组相比较,S+IR组SIRT3表达升高,Ac-FOXO1表达降低,LC3B、Beclin1表达升高,Bcl-2表达升高,Bax表达降低,LDH水平和细胞凋亡率降低(P<0.05);加入SIRT3抑制剂3-TYP后,与S+IR组相比,SIRT3表达水平无明显变化,但Ac-FOXO1表达升高,LC3B、Beclin1表达降低,Bcl-2表达降低,Bax表达升高,LDH水平和细胞凋亡率升高(P<0.05).结论 SIRT3-FOXO1通路激活可提高H9C2心肌细胞自噬水平,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用.
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