融合基因gfp-lacZ在克隆载体pGEM3Z-f(+)中高效表达

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目的:将西基因克隆到pCEM3Z-f(+)载体。方法:将PCR扩增得到的曲基因插入到pCEM3Z-f(+)质粒的Sma I位点,构建重组质粒转化大肠杆菌DH5α。结果:含重组质粒的大肠杆菌在自然光下呈现黄绿色,而在涂X-gal的培养基上它不仅发出黄绿色荧光,而且还出现蓝色。结论:gfp基因的插入没有引起载体上/lacZ基因的失活,而且形成的gfp-lacZ融合基因在大肠杆菌得到了表达。表达产物不仅具有GFP活性,而且保持了β-半乳糖苷酶的生物学活性。
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