目的 观察MEK、ERK及p-ERK在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达，探讨MEK／ERK信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用。方法用组织块结合酶消化法原代培养血管瘤内皮细胞，待细胞处于对数生长期，换无血清培养基培养48h，使细胞同步化，然后加入0．1ng／L雌二醇，50μmol／L普萘洛尔作为干预组，加入完全内皮细胞培养基作为对照组继续孵育24h。采用Western blot法检测血管瘤内皮细胞MEK、ERK及p-ERK的表达水平，同期用流式细胞计数仪检测血管瘤内皮细胞细胞周期及凋亡的变化，并分析MEK、ERK及p-ERK的表达水平与血管瘤内皮细胞周期及凋亡的关系。结果雌二醇干预后，MEK（0．14±0．01）、ERK1／2（1．36±0．11／0．52±0．10）和p-ERK1／2（0．12±0．03／0．85±0．10）与对照组MEK（0．08±0．00）、ERK1／2（1．16±0．06／0．29±0．04）和p-ERK1／2（0．06±0．02／0．42±0．08）比较，差异均有统计学意义（t=10．01，2．86／3．45，3．57／5．95，P〈0．05）；G0／G1期比例为（90．52±1．28）％，较对照组（94．02±0．85）％明显降低，差异有统计学意义（t=-3．98，P〈0．05）；细胞总凋亡率为（0．70±0.10）％，较对照组（1．77±0．21）％明显降低，差异有统计学意义（t=-8．00，P〈0．05）。普萘洛尔干预后，MEK（0．06±0．01）、ERK1／2（0．87±0．05／0．14±0．02）和p-ERK1／2（0．02±0．01／0．11±0．05）与对照组各项比较，差异均有统计学意义（t=-2．88，-6．79／-6．20，-3．96／-5．74，P〈0．05）；G0／G1期比率为（96．42±1．16）％，较对照组明显升高，差异有统计学意义（t=-2．89，P〈0．05）；细胞总凋亡率为（2．87±0．57）％，对照组明显升高，差异有统计学意义（t=3．14，P〈0．05）。结论MEK／ERK信号通路可能参与调控体外培养血管瘤内皮细胞的细胞周期和凋亡。雌激素、普萘洛尔可能通过干预MEK／ERK信号通路来调控体外培养血管瘤内皮细胞的增殖与凋亡。
MEK／ERK信号通路在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达及意义
【摘 要】
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目的 观察MEK、ERK及p-ERK在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达，探讨MEK／ERK信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用。方法用组织块结合酶消化法原代培养血管瘤内皮细胞，待细胞处于对数生长期，换无血清培养基培养48h，使细胞同步化，然后加入0．1ng／L雌二醇，50μmol／L普萘洛尔作为干预组，加入完全内皮细胞培养基作为对照组继续孵育24h。采用Western blot法检测血
【机 构】
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遵义医学院附属医院小儿矫形外科,563003,遵义医学院附属医院小儿矫形外科,563003,遵义医学院附属医院小儿矫形外科,563003,遵义医学院附属医院小儿矫形外科,563003,遵义医学院附属医
【出 处】
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中华小儿外科杂志
【发表日期】
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2014年35期
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