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目的
探讨在肾细胞癌肿瘤微环境中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)和FOXP3表达量与浸润性淋巴细胞的亚型分布、功能差异之间的关系。
方法2016年1月至2017年6月收集我院30例腹腔镜下根治性肾切除术后新鲜肾细胞癌肿瘤组织标本,分为肿瘤中心及肿瘤侵入性边缘两个区域,将标本分为两部分,一部分标本经包埋、冷冻切片后,采用免疫荧光组织染色法观察肿瘤组织中CD4+和CD8+T细胞的浸润情况,以及FOXP3和IFN-γ蛋白表达的相对分布。另一部分标本破碎后采用密度梯度离心法提取肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs),采用实时荧光定量PCR技术分别测定其中的FOXP3和IFN-γ的mRNA相对表达量。
结果免疫组织荧光染色检查图片显示肾细胞癌肿瘤组织中,肿瘤边缘有大量CD4+和CD8+T细胞浸润,肿瘤切片中FOXP3与IFN-γ的蛋白表达呈现此消彼长的分布状态。实时荧光定量PCR检测结果显示肿瘤中心和侵入性边缘的FOXP3基因相对表达量分别是64.6±9.4和36.2±1.8,差异有统计学意义(P<0.05);IFN-γ基因相对表达量分别为631.8±151.4和1 726.0±344.1,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论在肾细胞癌肿瘤微环境中,有杀伤功能的淋巴细胞相对集中地分布于肿瘤的侵入性边缘。