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目的
观察长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)在人肾透明细胞癌组织和细胞株中的表达,探讨过表达MEG3后对细胞增殖和凋亡的影响。
方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测MEG3在32对配对人肾透明细胞癌组织和癌旁症状组织及6株人肾透明细胞癌细胞株中的表达水平;在786-O细胞中稳定转染MEG3过表达质粒,分别利用噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞实验分析MEG3过表达后对细胞增殖和凋亡的影响;Western blot检测增殖与凋亡相关分子标志物。
结果肾透明细胞癌组织和细胞株中MEG3的表达明显低于对应的正常组织和细胞株;空载pcDNA3.1细胞与稳定转染MEG3的pcDNA3.1-MEG3细胞MEG3表达水平分别为0.51±0.02和11.26±1.89,差异有统计学意义(P<0.05);MTT实验结果显示,MEG3过表达后786-O细胞的增殖活性显著降低(P<0.05);流式细胞术检测细胞凋亡比例,空载pcDNA3.1细胞与稳定转染MEG3的pcDNA3.1-MEG3细胞凋亡比例分别为(7.02±1.21)%和(13.95±5.48)%,差异有统计学意义(P<0.05);两株细胞株中MEG3的过表达均可导致细胞周期素D1(Cyclin D1)下降和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)上升。
结论肾透明细胞癌中MEG3表达降低;MEG3可通过影响细胞增殖和凋亡在肾透明细胞癌中发挥抑癌作用。