研究miRNA-29（miR-29）家族对人慢性光损伤（光老化）皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响。

将人皮肤成纤维细胞分为未照射组和慢性光损伤组，后者给予长波紫外线（UVA）连续照射以构建慢性光损伤细胞模型，并用流式细胞仪及β半乳糖苷酶染色法验证模型。Western印迹检测两组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-29家族3个成员（miR-29a-3p、miR-29b-3p和miR-29c-3p）在两组细胞中的表达，选择表达具有显著差异的miR-29c-3p进行功能试验。将人皮肤成纤维细胞分为4组，分别采用荧光标记的miRNA-29c-3p模拟物（过表达组）、抑制物（抑制组）及二者各自的对照RNA寡核苷酸（阴性对照组和抑制对照组）转染各组细胞，观察各组荧光细胞比例，qRT-PCR法检测各组miR-29c-3p的相对表达量，判定干扰效率。采用qRT-PCR法检测转染后4组COL1A1和COL3A1 mRNA水平，Western印迹法检测转染后Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。

与未照射组相比，慢性光损伤组衰老染色细胞阳性率显著升高（36.47% ± 3.20%比12.56% ± 1.46%，P < 0.01），G1期细胞比例明显升高，S期细胞比例明显降低（均P < 0.01），慢性光损伤模型成功建立。慢性光损伤组Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达（0.40 ± 0.19和0.52 ± 0.10）明显低于未照射组（1.00 ± 0.12和1.00 ± 0.10，均P < 0.01），而miR-29c-3p（4.42 ± 2.05）明显高于未照射组（0.89 ± 0.10，P < 0.05），两组间miR-29a-3p和miR-29b-3p表达水平差异无统计学意义（均P > 0.05）。转染后24 h，过表达组和抑制组的转染效率均大于90%，达到干预要求。过表达组miR-29c-3p的表达（224.17 ± 2.00）明显高于阴性对照组（2.45 ± 0.34），而抑制组（0.20 ± 0.08）明显低于抑制对照组（2.24 ± 0.14），干扰模型构建成功。评价转染效率显示，过表达组COL1A1和COL3A1 mRNA和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均明显低于阴性对照组和抑制组（均P < 0.05），而抑制组明显高于抑制对照组（均P < 0.01）。

miR-29c-3p在慢性光损伤皮肤成纤维细胞中表达上调，可能通过调控COL1A1、COL3A1的表达影响Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成。