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犬细小病毒病感染是由犬细小病毒（CPV）引起犬只死亡的最重要传染病之一，目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板法，虽然检测方法较简便快速，但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析，选择该病毒VP2基因保守序列设计引物，通过对阳性病料扩增及扩增产物测序，与NCBI发表的相关基因对比，同源性在99.8%~100%，成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法，最低只需2.5 pg DNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中，本方法检出25例阳性、3例阴性，阳性率为89.28%；胶体金检测板检测出20例阳性、8例阴性，阳性率为71.42%，证实PCR方法比胶体金检测更敏感。