【摘 要】
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目的优化基于微波辅助的快速超薄切片染色的关键参数,建立一种快速超薄切片染色方法。方法使用微波组织处理仪以不同功率及染色时间分别用乙酸双氧铀(uranium acetate,UA)和枸橼酸铅(lead citrate,LC)对细胞超薄切片进行染色,通过透射电子显微镜观察并拍照细胞超微结构,评价两种染色剂的最佳染色条件,组合UA和LC最佳微波染色条件,获得最佳UA和LC双染色参数。用腺病毒、肠道病毒7
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室,北京 100052,湖南师范大学,长沙 410081,中南大学,长沙 410008,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 传染病预防
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目的优化基于微波辅助的快速超薄切片染色的关键参数,建立一种快速超薄切片染色方法。
方法使用微波组织处理仪以不同功率及染色时间分别用乙酸双氧铀(uranium acetate,UA)和枸橼酸铅(lead citrate,LC)对细胞超薄切片进行染色,通过透射电子显微镜观察并拍照细胞超微结构,评价两种染色剂的最佳染色条件,组合UA和LC最佳微波染色条件,获得最佳UA和LC双染色参数。用腺病毒、肠道病毒71型、疱疹病毒和流感病毒感染的细胞样本验证超薄切片快速染色效果。
结果微波组织处理仪优选微波辅助超薄切片染色条件分别为功率200 W、UA染色30 s、LC染色20 s;或者功率300 W、UA染色30 s、LC染色30 s。LC浓度1∶6稀释仍可获得满意的染色效果。参数可推广至家用微波炉应用,最佳染色条件为功率320 W,UA染色30 s、LC染色30 s。
结论获得了微波辅助的超薄切片染色最佳参数,可应用于细胞、病毒超薄切片的快速染色。
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