以拟南芥（Arabidopsis thaliana）野生型、NADPH氧化酶突变体和硝酸还原酶（NR）突变体为材料,借助气孔试验和激光扫描共聚焦显微镜技术,对H₂O₂和NO的酶源以及H₂O₂和NO的关系进行了研究。结果表明:高浓度CO₂关闭了野生型的气孔,该效应在AtrbohF突变体中部分缺失、在AtrbohD/F中完全缺失,但在AtrbohD中未见缺失;同时,高浓度CO₂诱导野生型保卫细胞H₂O₂产生的效应在AtrbohD和AtrbohF中部分降低,但在AtrbohD/F中完全缺失。这些结果显示,AtrbohD和AtrbohF催化产生的H₂O₂参与高浓度CO₂诱导气孔关闭。高浓度CO₂能诱导野生型保卫细胞NO合成和气孔关闭,该效应在Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2突变体中完全缺失,但在Nia2-1中未缺失,显示Nia1来源的NO参与高浓度CO₂诱导气孔关闭。高浓度CO₂未诱导AtrbohF和AtrbohD/F保卫细胞NO合成,但诱导Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2保卫细胞H₂O₂产生。NO供体SNP显著恢复AtrbohF和AtrbohD/F突变体气孔对高浓度CO₂反应的缺失,但H₂O₂未恢复Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2气孔对高浓度CO₂反应的缺失。所以,高浓度CO₂诱导气孔关闭中NO合成依赖于H₂O₂产生。