【摘 要】
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为构建高效的西瓜再生和遗传转化体系,本研究以西瓜’SM1’材料子叶节为外植体,研究不同激素配比对子叶节再生的影响.在此基础上,通过农杆菌介导法导入外源基因,研究潮霉素浓
【机 构】
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江苏省农业科学院蔬菜研究所,江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,南京,210014
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为构建高效的西瓜再生和遗传转化体系,本研究以西瓜’SM1’材料子叶节为外植体,研究不同激素配比对子叶节再生的影响.在此基础上,通过农杆菌介导法导入外源基因,研究潮霉素浓度、农杆菌侵染时间、共培养时间等因素对遗传转化效率的影响,建立遗传转化体系.结果表明,’SM1’不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,不定芽分化率为91.7％.最优遗传转化组合为农杆菌侵染时间15 min,共培养3 d,之后进行选择培养.外植体不定芽分化潮霉素最适浓度为10 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L.通过潮霉素筛选和PCR鉴定,获得12株阳性转化株系,转化率为6.5％.本研究建立了高效西瓜’SM1’再生及遗传转化体系,为进一步开展基因功能研究及西瓜遗传改良提供了技术支撑.
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