GnIH过表达载体构建及其对小鼠睾丸间质细胞的作用研究

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nini8919

【摘要】

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本试验通过构建GnIH过表达载体,探究其对小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞系)的凋亡效应及睾酮合成的调节作用。从6~8周雄性小鼠睾丸组织中提取RNA,反转录获得cDNA样本,利用PCR扩增并纯化GnIH基因,应用T4连接酶将其连入PLVX-IRES-ZsGreen1载体,进一步转化到感受态菌中,通过PCR、双酶切及测序鉴定后提取质粒。随后将构建好的重组质粒转染TM3细胞系72 h,分为空质粒组和GnIH过表达组,通过显微镜观察细胞荧光、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法、ELISA法和流式细胞术检测GnI

【作者】

：

汤亚茹阳美霞贾金美张虹亮王水莲

【机构】

：

湖南农业大学动物医学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2021年10期

【关键词】

：

GNIH 载体构建间质细胞细胞凋亡睾酮睾酮合成酶

【基金项目】

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湖南省教育厅重点项目(18A095)。

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