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用限制性内切酶Ｐｓｔ Ｉ部分消解含有美洲鲽抗冻蛋白基因的ｐＣＴ５质粒，分离得到３２４ｂｐ的片段，将此片段亚克隆到ｐＵＣ１９质粒中，筛选到ｐＵＣ－ＡＦ重组子。从ｐＵＣ－ＡＦ重组子中，用ＢａｍＨＩ和ＨｉｒｄⅢ切下３２４ｂｐ的抗冻蛋白基因，再重组到含有ＳＶ４０病毒启动子的ｐＫＳＶ－１０的载体中，构建成转基因鱼的表达载体，此表达载何可用于鱼的基因转移的研究。