【摘 要】
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目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)配体是否通过阻断肝星状细胞的TGF β1型受体(TGFβR1)信号途径,阻止Smad3磷酸化而抑制纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、胶原蛋
【机 构】
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河北医科大学第三医院感染科,美国杜克大学消化病科
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目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)配体是否通过阻断肝星状细胞的TGF β1型受体(TGFβR1)信号途径,阻止Smad3磷酸化而抑制纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、胶原蛋白1αⅠ的表达,发挥其抗纤维化的作用.方法 用促进脂肪细胞分化的培养液预处理人肝星状细胞LX-2,使其呈现脂肪细胞的某些表型,从活化状态转为静止型,分别加用TGF β1或TGFβ1加TGFβR1激酶抑制剂SB431542或TGFβ1加PPARγ配体Ciglitazone处理LX-2细胞.分别用荧光实时定量PCR、Western blot、荧光素酶分析的方法检测PPARγ配体对LX2细胞用TGFβ1诱导前后Smad3磷酸化水平、PAI-l的mRNA与蛋白表达水平和PAI-1启动子活性、胶原蛋白1αⅠmRNA表达水平的影响.结果 诱导脂肪细胞分化的培养液可使LX-2细胞出现脂质沉积与静止型肝星状细胞的标志物之-PPARγ表达的增加.TGFβ1以剂量和时间依赖的方式增加细胞外基质蛋白的表达,胶原蛋白1αⅠ和PAI-1 mRNA的表达在3h内增加3倍,PAI-1蛋白的表达在6h内增加8倍.TGF β1诱导的Smad3磷酸化导致胶原蛋白1 αⅠ和PAI-1表达增加.PPARγ配体Ciglitazone与TGFβR1激酶抑制剂SB431542,均以剂量依赖的方式阻断TGF β1的上述作用,10μmol/L SB431542,1μmol/L的Ciglitazone可以阻断TGFβ1诱导的Smad3磷酸化、胶原蛋白1αⅠmRNA、PAI-1 mRNA和蛋白的表达.结论 PPARγ配体Ciglitazone抗纤维化作用可能与其对TGF β1-TGF βR1信号传导、Smad3磷酸化的阻断作用有关,进而抑制胶原蛋白1αⅠ和PAI-1的表达.
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