【摘 要】
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为在原核表达系统中表达猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因片段,提取感染PCV2的细胞基因组DNA,PCR扩增ORF2基因片段并克隆至pMD-18T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定后,将该基因重组至p
【机 构】
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郑州大学生物工程系,河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室,河南省农业科学院农业经济与信息研究中心
【基金项目】
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国家“863”计划（2007AA100609）
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为在原核表达系统中表达猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因片段,提取感染PCV2的细胞基因组DNA,PCR扩增ORF2基因片段并克隆至pMD-18T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定后,将该基因重组至pET-28a原核表达载体,构建了表达载体pET-28a-ORF2。该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1mmol/LIPTG于37℃诱导5h得到最佳表达。表达重组蛋白的分子量为26.0kD,以包涵体形式存在。Western-Blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反
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