【摘 要】
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目的:探讨前列腺癌相关基因PAX5基因启动子甲基化作为前列腺癌生物标志物的临床价值.方法:采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测正常前列腺细胞系(RWPE-1)和前列腺癌细胞系(LNCaP
【机 构】
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徐州医科大学医学技术学院,江苏徐州,221004;徐州医科大学附属医院检验科,江苏徐州,221002;徐州医科大学形态学科研实验中心,江苏徐州,221004
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目的:探讨前列腺癌相关基因PAX5基因启动子甲基化作为前列腺癌生物标志物的临床价值.方法:采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测正常前列腺细胞系(RWPE-1)和前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3、DU145)中PAX5 mRNA的表达,甲基化特异性PCR(MSP)法分析4株前列腺细胞的甲基化状态;去甲基化药物处理后,qRT-PCR法检测肿瘤细胞PAX5基因mRNA表达;实时定量MSP法检测64例前列腺癌患者、22例前列腺增生患者与47例健康体检者血清中PAX5基因启动子甲基化水平,并统计分析血清PAX5基因启动子甲基化水平与临床病理参数的相关性;运用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析PAX5基因启动子甲基化在前列腺癌诊断中的价值.结果:qRT-PCR结果显示,与正常前列腺上皮细胞RWPE-1相比,PAX5mRNA在3株前列腺癌细胞中均表达下调,而且均可检测到PAX5基因启动子甲基化,而正常前列腺上皮细胞RWPE-1不存在PAX5基因启动子甲基化;去甲基化药物可恢复PAX5基因mRNA表达;实时定量MSP结果显示,前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化水平显著高于前列腺增生患者和健康体检者;前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化率与Gleason评分和TNM分期有关;ROC结果显示PAX5基因的诊断价值优于前列腺特异抗原PSA.结论:本研究结果提示启动子甲基化是前列腺癌细胞中PAX5基因表达下调的主要原因,血清PAX5启动子甲基化是一种潜在的前列腺癌诊断标志物.
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