黑曲霉基因文库的构建及葡萄糖淀粉酶基因的克隆

来源 :中山大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoliang668
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用噬菌体λEMBL3DNA为载体成功地构建了黑曲霉3758的完整的基因文库。供体黑曲霉染色体DNA经EcoRI部分霉切和蔗糖密度梯度离心,回收15-20kb片段,以一定的比例与经EcoRI处理的载体λEMBL3DNA连接,连接产物用大肠杆菌SMR10单菌系统提取的包装蛋白进行体外包装,包装物感染宿主大肠杆菌Q359,获得2.5×10^5重组噬菌体/μgDNA的包装效率,比Clarke-Carbon公式对构建黑曲霉染色体基因文库要求的重组克隆数高10倍。以编码葡萄糖淀粉酶第329-481位氨基酸的
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