【摘 要】
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目的研究补骨脂水煎液（WD）和醇提物（EE）促骨骼发育与安全性的差异。方法将受精后3 d（3 dpf）斑马鱼幼鱼暴露于泼尼松龙（PN）25μmol·L-1和WD或EE 0.1,1,10和100 mg生药·L-1,以及依替
【机 构】
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南京中医药大学第三临床医学院,江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药释药系统重点研究室,中国人民解放军93038部队医院
【基金项目】
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国家科技重大专项(2017ZX09301-056);中医药行业科研专项(201507004-10);国家自然科学基金(81573833);江苏省自然科学基金(BK20141507);江苏省自然科学基金(BK2011866);江苏省六大人才高峰基金(2013-YY006);江苏省第四期“333工程”科研项目(BRA2014348)~~
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目的研究补骨脂水煎液（WD）和醇提物（EE）促骨骼发育与安全性的差异。方法将受精后3 d（3 dpf）斑马鱼幼鱼暴露于泼尼松龙（PN）25μmol·L-1和WD或EE 0.1,1,10和100 mg生药·L-1,以及依替膦酸二钠（ED）30 mg·L-1溶液中,隔天换液至9 dpf处死。茜素红染色光学显微镜观察斑马鱼头骨骨矿化面积和骨密度,荧光定量PCR法检测9 dpf斑马鱼骨保护素（OPG）和NF-κB受体活化因子配体（RANKL）m RNA表达。另将1 dpf斑马鱼胚胎置于EE 10,20,30,35,40,50和60 mg生药·L-1、WD 10,50,100,125,150,175,200和500 mg生药·L-1、补骨脂素（PS）12.5,25,50,100,200和400μmol·L-1及补骨脂酚（BK）1,5,10,25和50μmol·L-1溶液中,光镜检测3 dpf斑马鱼胚胎形态,观察记录给药后29 dpf胚胎或幼鱼死亡数,SPSS软件计算4,6和9 dpf LC50;另用速率法检测6 dpf斑马幼鱼谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）活性。结果与模型组相比,EE 0.1 mg生药·L-1和WD 1 mg生药·L-1能显著增加斑马鱼头部骨骼染色面积和骨密度（P<0.01）,提示增加骨矿化量;且WD和EE 1 mg生药·L-1均上调OPG m RNA、下调RANKL m RNA表达水平（P<0.01）,OPG/RANKL比值显著提高（P<0.01）。EE,WD,PS和BK可致斑马鱼心包、卵黄囊肿大,GOT活性降低（P<0.01）,WD和PS的LC50值分别为EE和BK的47倍和4.320倍。结论 EE较WD促骨骼发育活性强,且毒性更大,提示脂溶性特征性成分可能是起效或致毒的关键成分。
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