【摘 要】
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为快速鉴定因肺炎克雷伯菌侵染引起的奶牛乳房炎，进一步为该疾病提供更合理的治疗方案，分别以肺炎克雷伯菌16S -23S rDNA内部转录间隔层序列（Internal transcribed spacer， ITS）和脲酶UreD基因为靶点，利用PCR技术和环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification， LAMP）构建奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌快速鉴定
【基金项目】
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湖南省重点研发计划项目（2022NK2025，2020NK2066）； 长沙市科技计划项目（kh2201218）； 湖南创新型省份建设专项（2022NK4153）；
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为快速鉴定因肺炎克雷伯菌侵染引起的奶牛乳房炎，进一步为该疾病提供更合理的治疗方案，分别以肺炎克雷伯菌16S -23S rDNA内部转录间隔层序列（Internal transcribed spacer， ITS）和脲酶UreD基因为靶点，利用PCR技术和环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification， LAMP）构建奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌快速鉴定方法。结果表明，利用PCR技术扩增ITS序列能准确鉴定出肺炎克雷伯菌，在核酸质量浓度为5×10-2 ng/μL的环境中依然能实现稳定扩增；利用LAMP技术扩增Ure-d基因的最佳反应温度为62℃，其最低检测核酸质量浓度为5×10-7 ng/μL，检测灵敏度是PCR方法的105倍。综上建立了PCR技术和LAMP技术快速鉴定奶牛乳房炎型肺炎克雷伯菌的方法，特异性强且灵敏度高。
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