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目的
探讨不同配比SiO2纳米颗粒/胶原蛋白复合材料作为神经支架的生物学特性。
方法2013年3月至2014年5月,采用冻干技术制作浓度分别为5、10、25、50、100和200 μg/ml SiO2纳米颗粒浓度的胶原蛋白神经支架,不含SiO2纳米颗粒的胶原支架作为本研究的对照组。动态光散射仪测量SiO2纳米颗粒的直径和大小,SEM观察纳米颗粒的形态。支架内接种培养许旺细胞(SCs),检测支架的细胞相容性,光镜下观察不同样本中SCs形态,MTT检测SCs在SiO2纳米颗粒/胶原复合支架的附着和增殖效果,荧光分光光度计测定支架内细胞经H33258染色后的DNA含量。上述实验数据经多重比较检验法后进行单向方差分析,P < 0.05为差异有统计学意义。
结果SiO2纳米颗粒呈球形,平均直径分布在150~190 nm,SCs在支架上培养了1 d和3 d后,所有培养的细胞中(除了100 μg/ml支架中生长的细胞)都处于正常状态,其他样品的所有细胞中都呈纺锤形并伴随轴突延伸,细胞没有表现出明显的形态学差异。MTT细胞相容性检测显示,SCs的活性和增殖度先升高,后随着SiO2颗粒浓度的增加而降低,SCs的活性和增殖度在25 μg/ml中表现最高,而当浓度大于50 μg/ml时明显降低,这与细胞形态变化的相符。DNA含量起初增加后随着浓度的增加而降低,25 μg/ml时DNA含量最多(P < 0.05),DNA含量与细胞形态变化相符。
结论25 μg/ml的SiO2纳米颗粒/胶原蛋白支架有可能成为一种新的周围神经缺损修复材料。