探讨微RNA-204（miR-204）对宫颈癌Hela细胞侵袭性的影响及其机制。
方法将Hela细胞分为4组，阴性对照组加入随机序列对照物，miR-204模拟物组和miR-204抑制物组分别加入miR-204模拟物（agomir-204）和miR-204抑制物（antagomir-204），空白对照组不进行处理。72 h后收集细胞，荧光定量实时PCR检测各组细胞miR-204水平，免疫印迹法检测各组细胞埃兹蛋白（EZR）表达。使用在线工具预测EZR基因3′非翻译区（3′ UTR）序列中的miR-204靶向序列。将EZR基因上的miR-204靶向序列克隆到双荧光素酶报告载体上，载体分别与agomir-204（miR-204模拟物组）、antagomir-204（miR-204抑制物组）、随机序列对照物（阴性对照组）共转染Hela细胞，设空白对照组不进行转染，检测各组细胞双荧光素酶相对活性比值。Transwell法检测miR-204对Hela细胞侵袭性的影响。
结果荧光定量实时PCR显示，与空白对照组和阴性对照组比较，miR-204模拟物组Hela细胞miR-204表达显著增加，而miR-204抑制物组miR-204表达显著降低（均P<0.05）。免疫印迹显示，随着miR-204表达增加EZR蛋白表达下调。预测软件发现EZR基因3′ UTR序列上1个miR-204结合靶点，测序验证显示靶点序列已经正确克隆入双荧光素酶报告载体。双荧光素酶报告基因系统检测显示，与空白对照组和阴性对照组比较，miR-204模拟物组双荧光素酶相对活性比值显著下调，而miR-204抑制物组双荧光素酶相对活性比值显著上调（均P<0.05）。Transwell法检测显示，与空白对照组和阴性对照组比较，miR-204模拟物组穿膜细胞数显著减少，而miR-204抑制物组穿膜细胞数显著增加。
结论miR-204能够通过作用于EZR基因的靶点序列负调控宫颈癌Hela细胞EZR蛋白表达，并抑制细胞的侵袭性。