【摘 要】
：
【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidases 4,GPX4）失活如何参与调控脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞，以DMSO为对照，使用0.1～5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理，通过CCK-8法检测细胞活力和Western
【机 构】
：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室
【基金项目】
：
中国富硒产业研究院富硒专项研发计划项目（2019QCY-3.3）； 中国农业科学院科技创新工程协同创新任务（CAAS-XTCX20190025-8）;中国农业科学院科技创新工程（ASTIP-IAS-12）；
论文部分内容阅读
【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidases 4,GPX4）失活如何参与调控脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞，以DMSO为对照，使用0.1～5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理，通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平，确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组：对照组，添加DMSO培养24 h; FIN56（GPX4抑制剂）组，添加0.5μmol/L FIN56培养24 h; DMSO-LPS组，DMSO培养24 h后使用LPS（100 ng/mL）刺激3 h; FIN56-LPS组，FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后，利用荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2′,7′-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, H2DCFDA）检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平，使用试剂盒法检测细胞内丙二醛（malondialdehyde, MDA）水平，分别使用ELISA和荧光定量PCR检测促炎细胞因子白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的分泌水平和基因表达量，使用Western blotting法检测Toll样受体4（toll like receptor 4,TLR4）信号通路相关蛋白表达水平。【结果】与DMSO处理相比，0.5μmol/L FIN56处理巨噬细胞24 h对细胞活性无显著影响（P＞0.05）,且显著降低GPX4蛋白表达水平（P＜0.05）,故选用0.5μmol/L FIN56用于后续实验。与对照组相比，FIN56和LPS均显著增加了ROS积累（P＜0.05）,而与DMSO-LPS组相比，FIN56-LPS组ROS水平显著升高（P＜0.05）。与对照组相比，LPS可显著增加小鼠巨噬细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达量和IL-6含量，以及c-Jun氨基末端蛋白激酶（c-Jun N-terminal protein kinase, JNK）和c-Jun磷酸化水平（P＜0.05）,而FIN56可显著下调LPS诱导的IL-6的mRNA表达量和含量及JNK和c-Jun磷酸化水平（P＜0.05）,但对p38蛋白（p38 MAPK,p38）、细胞外调节蛋白激酶（phosphorylate extracellular regulated protein kinases1/2,Erk1/2）蛋白表达水平无显著影响（P＞0.05）。【结论】GPX4失活可有效阻断JNK和c-Jun磷酸化，从而特异性抑制LPS诱导的巨噬细胞的炎症反应。该结果可为以GPX4为靶点研发抗炎治疗策略提供理论依据。
其他文献
＜正＞儿童在阳光下观察到物体的影子,引发了好奇心:影子来自哪里?影子会改变形状吗?影子会飞吗?下雨时能看见影子吗?为什么影子就在那里,我们却抓不住?影子会消失吗?影子明明没有重量,为什么会沉到游泳池底?我们可以让影子停下来吗?为什么我有时只有一个影子,有时有两个……儿童的"十万个为什么"凸显了他们强烈的好奇心和敏锐的观察力。
汉魏时期，賨人、冉駹分别居于四川盆地的东、西两侧，虽然他们在相关文献中被称为“氐”,但后世好些研究者并不认为二者与狭义上的“氐人”为同类。不过，古籍记录的出自賨人、冉駹的语词都可用藏语进行释读，即在语言方面，二者确实与狭义的操氐语（一种古代藏语方言）的“氐”相近甚至相同。如此，古人之将賨人、冉駹称为“氐”是合理的，他们对当时族群的分类值得今人考虑，乃至采纳。
西户铁路是陇海铁路分支线路，位于西安市西南部，1956年通车，2000年停运市郊列车，现仅办理货运作业，承担沿线企业货物运输。西户铁路已运行65 a,社会经济与沿线用地发生显著变化，时至今日，老旧货运专线与现代化高品质城市发展不能匹配。通过对西户铁路改造提升，可有效减少铁路对城市道路系统干扰，优化城市公共交通运行效率，提升铁路沿线环境品质，提高既有铁路利用效率，盘活铁路存量资产。
网络零售作为国内消费的重要组成部分，研究其具体影响因素对促进新发展格局、激发消费潜力意义重大。为此本文基于中国家庭金融调查数据（CHFS），利用多元混合效应模型研究家庭网购支出和网购消费率的主要影响因素及其变化趋势。结果表明：家庭基本经济特征以及网购时的主观偏好对网购支出均具有显著影响并呈现出不同的变化趋势；快递配送到家能有效提高家庭的网购意愿；家庭网购支出呈现出以浙江为中心从沿海向内陆递减的空间
随着互联网行业与金融行业之间交流的日益精密，互联网金融对经济发展的影响也逐渐显著。本文基于互联网金融的发展现状，结合实际数据探索互联网金融对经济发展的影响，结果显示互联网金融的发展为经济发展提供助力。最后本文为互联网金融长久稳定的助力经济发展而提出几条建议。
＜正＞菲茨杰拉德作为美国现代主义时期的经典作家，其小说以对感官的独到捕捉，将平面化的文本阅读转变为立体化的审美感受，以光与色的流动形成了独到的文学印象主义艺术风格。对人物精神结构的开掘与对具有时代象征意味的意象物的创设，更使其小说在美学意义之外获得了深刻的精神价值，成为刻写时代历史的文学绝唱。一、印象主义的感官叙事现代主义思潮的涌入颠覆了传统叙事以情节为核心的创作方法，以感官为标志的人的主观体验开
在新媒体迅速发展的背景下,催生了与时俱进的新型营销人才的巨大需求。本文从对新媒体一词的理解。新媒体营销的背景、新媒体营销的特点、新媒体营销的策略、新媒体营销的挑战等角度,分析对新媒体营销的认识,以期推动和实现新媒体营销更好的建设与发展。
以武汉市南湖中学八（14）班全体学生为研究对象，以行动研究法作为主要研究方法，同时结合定性和定量研究，以期改进学生在英语直播课堂上的参与度问题。研究发现：本班学生整体对线上英语直播课持满意态度；网络设备会影响学生的课堂出勤；课前文字上课提醒效果最佳；学生参与线上课互动情况与线下课堂呈现一致性，应营造轻松和谐的课堂氛围，让更多学生有课堂参与感。