盐藻磷酸甘油脱氢酶基因cDNA文库的构建

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采用Lambda gt10载体构建了盐藻cDNA文库,文库大小为10^6/mL插入片段平均长度大于1kb。根据果蝇,兔,鼠编码其3-磷酸甘油脱氢酶基因的辅酶NAD的结合功能区保守序列设计一对引物,大小分别为21bp和18bp。PCR扩增得到与果蝇相同的290bp特异扩增片段,以该片段为探针,采用缺口平移系统标记原位杂交,从盐藻cDNA文库中获得36个3-磷酸甘油脱氢酶基因的阳性克隆。
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